猪源伪狂犬病病毒gB蛋白抗体阻断ELISA的建立与应用

摘要：

利用伪狂犬病病毒(PRV)ZJ01毒株重组gB蛋白及其对应的HRP标记的单克隆抗体,旨在建立一种检测伪狂犬病病毒gB抗体的阻断ELISA.对ELISA反应条件进行了优化,具体为:包被抗原的质量浓度为0.5 g/ mL;待检血清的稀释比例为1 ∶ 1,孵育条件是37 ℃作用1 h;酶标单抗的稀释度为1 ∶ 15 000,作用时间为37℃ 0.5 h.ELISA结果的判定标准为:血清样品阻断率PI≥28.67％时判为阳性;PI≤18.27％时判为阴性;18.27％<PI<28.67％时判为可疑.该ELISA能特异性地识别PRV阳性血清, 而与PRRSV、PCV2、CSFV和FMDV阳性血清无交叉反应性.ELISA的重复性试验表明,批间和批内的变异系数均小于10％.比较试验结果表明,该ELISA的相对敏感性和特异性分别为80.9％和96.4％,与IDEXX PRVgBELISA试剂盒的符合率为85.1％.用建立的此ELISA对田间采集的535份猪临床血清样品进行了检测,结果显示,PRV抗体阳性率达61.87％.综上所述,本试验建立的猪源伪狂犬病病毒gB蛋白抗体阻断ELISA具有特异、简单、快速的优点,为建立标准化的检测试剂盒奠定了基础.

关键词：猪、伪狂犬病病毒、gB蛋白、阻断ELISA

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分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省农业科技自主创新资金项目CX15100604;国家生猪产业技术体系专项CARS-36;国家重点研发计划项目2016YFD0500105

在线出版日期：2018-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：712-716