H3N2亚型犬流感病毒单链抗体的制备

摘要：

为制备犬流感病毒(CIV)单链抗体(scFv),采用纯化的CIV抗原免疫BALB/c小鼠后,取小鼠脾组织提取总RNA,采用PCR方法扩增重链、轻链可变区基因片段,利用重叠延伸PCR将重链、轻链通过弹性肽链连接物Linker连接,构建VH-Linker-VL融合片段,并将其插入原核表达载体PET-32a(+ )后转化大肠杆菌,重组菌经IPTG诱导表达,获得45 ku左右的目的蛋白.Western-blotting结果表明,该蛋白能被抗His标签的单抗特异性识别.间接ELISA及中和试验结果表明,scFv能够与CIV发生特异性结合反应,具有中和活性.本研究成功制备了针对H3N2亚型CIV单链抗体,为该病毒感染的诊断和治疗提供了物质基础.

关键词：犬流感病毒、单链抗体、原核表达、中和活性

所属期刊栏目：48

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目2017YFD0501101;科技部国际合作专项2014DFG32770

在线出版日期：2018-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：574-579