猪免疫调控分子B7-H4的单克隆抗体制备及其在免疫细胞中的表达分析

摘要：

B7-H4分子是B7家族的成员之一.在人和小鼠的研究显示,该分子对T细胞免疫学功能的发挥具有重要调节作用.但是该分子在猪免疫系统中的功能还没有报道.本研究通过PCR技术扩增到了猪的免疫调控分子B7-H4(pB7-H4)的基因片段,并将其克隆到pET-32a(+)原核表达载体,获得了pET-32a-pB7-H4.用原核表达并纯化的重组pB7-H4蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA筛选出了1株抗pB7-H4蛋白的单克隆抗体(MAb)杂交瘤细胞株3C8,MAb亚类鉴定结果显示其抗体亚类为IgGl.流式细胞仪分析结果显示,该MAb能特异性结合细胞系上瞬时表达的pB7-H4.利用该单抗进一步分析pB7-H4在猪外周血T淋巴细胞、巨噬细胞和肺泡巨噬细胞上的表达,结果,pB7-H4在肺泡巨噬细胞和外周血巨噬细胞中高效表达,但是在T淋巴细胞中检测不到明显的表达.上述研究结果表明,该单抗的制备为进一步研究pB7-H4的免疫学功能提供了有效工具.

关键词：猪B7-H4、原核表达、单克隆抗体、免疫细胞、流式细胞检测

所属期刊栏目：48

分类号：S852.43(动物医学（兽医学）)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

在线出版日期：2018-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：545-551