LncRNA TCONS_00179042对Marc-145细胞中PRRSV复制的影响

摘要：

应用转染LncRNATCONS_00179042过表达质粒pcDNA3.1-TCONS_00179042的Marc-145细胞,观察该LncRNA对PRRSV GSWW15毒株复制的影响.利用RT-PCR方法扩增出猪肺泡巨噬细胞(PAMs)被PRRSV GSWW15株感染后下调表达的LncRNA TCONS_00179042全长序列;通过qPCR、TCID50测定和Western-blot分析该LncRNA对PRRSVGSWW15株复制的影响;通过核质分离试验对PAMs细胞中LncRNATCONS_ 00179042进行定位和半定量分析.RT-PCR检测结果显示,LncRNA TCONS_00179042长度约为430 bp. pcDNA3.1-TCONS_00179042过表达载体转染Marc-145细胞后,qPCR结果显示:该LncRNA的相对表达量约是对照组的3×105倍,表明LncRNATCONS_00179042能在Marc-145细胞中过表达.利用PRRSVGSWW15株感染过表达LncRNA TCONS_00179042的Marc-145细胞后,qPCR结果显示:过表达LncRNA组PRRSV RNA拷贝数约为对照组的60％;TCD50检测结果显示:过表达LncRNA组PRRSV病毒滴度显著低于对照组,约为对照组的20％;Western-blot试验结果显示:过表达LncRNA组PRRSVN蛋白的表达量显著低于对照组.三组数据均显示,LncRNATCONS_00179042能在Marc-145细胞中抑制PRRSVGSWW15株的复制.核质分离试验结果显示,不论是细胞质还是细胞核均有LncRNATCONS_00179042存在,且细胞核中的表达量大于细胞质中.本研究结果表明,该LncRNA能在Marc-145细胞中抑制PRRSV的复制,能作为一种抗病毒分子参与调控宿主的抗病毒反应.

关键词：PRRSV、LncRNATCONS_00179042、Marc-145细胞、过表达、复制

所属期刊栏目：48

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国农业科学院基本科研业务费和创新工程经费资助

在线出版日期：2018-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：537-544