伪狂犬病病毒gB抗原的可溶性原核表达及纯化条件的优化

摘要：

为实现伪狂犬病病毒gB蛋白的可溶性表达,基于伪狂犬病病毒gB基因的序列分析及密码子优化,基因合成gB基因胞外区(含全部抗原表位)序列,亚克隆至原核表达载体pSMK中,获得表达载体pSMK-gB.经大肠杆菌诱导表达,并对诱导温度、可溶性、IPTG加入时机、终浓度及诱导时间进行优化.结果表明,伪狂犬病病毒的gB蛋白在16℃、D600值为1.2、IPTG终浓度为0.8 mmol/L的条件下,诱导20h,蛋白表达效果最好.经超声破碎,镍柱纯化可获得可溶性的gB蛋白.蛋白印迹法分析结果表明,纯化的目的蛋白能与抗组氨酸标签的抗体及猪伪狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性.本研究为后期制备猪伪狂犬病血清检测ELISA试剂盒奠定了基础.

关键词：伪狂犬病病毒、gB基因、可溶性表达、原核表达

所属期刊栏目：48

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家国际科技合作专项基金;国家自然科学基金;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中国农科院青年英才计划;国家重点研发计划

在线出版日期：2018-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：175-181