猪繁殖与呼吸综合征病毒GDr180疫苗株与其他毒株PCR-HRM鉴别检测方法的建立

摘要：

为建立一种快速鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)疫苗株GDr180株与其他毒株的PCR-HRM检测方法,比对NCBI登录的PRRSV全基因序列,筛选GDr180株与其他株的差异位点.PCR反应体系在加入LC Green染料及3’端封闭的探针下进行不对称PCR扩增,在HRM功能模式下进行PCR产物的熔解曲线分析.结果显示,GDr180株PCR产物的熔解曲线探针峰Tm值为72.64±0.39℃,而PRRSV其他株的探针峰Tm值为65.63±0.69℃或无探针峰,两者差异极显著.用本方法引物扩增非PRRSV如猪流行性腹泻病毒(PEDV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒(PCV)和猪轮状病毒(PoRV)无特异性目的条带,标准品检测灵敏度为1 000 copies/μL.本研究建立的PCR-HRM是一种高通量、经济、简便和可靠的用于鉴别PRRSVGDr180株与其他毒株的方法.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、不对称PCR、HRM

所属期刊栏目：47

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省科技计划;广东省科技计划

在线出版日期：2018-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1492-1496