10.16656/j.issn.1673-4696.2017.12.002
猪环曲病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立和应用
根据猪环曲病毒N基因保守序列设计特异性引物与TaqMan探针,建立猪环曲病毒荧光定量RT-PCR检测方法,并评价其特异性、敏感性和重复性.结果显示,该方法能检测猪环曲病毒,而对猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、猪星状病毒、A群猪轮状病毒、猪博卡病毒、猪嵴病毒和伪犬病病毒等核酸的检测均无交叉反应,具有良好的特异性;建立的定量标准曲线Ct值和模板终浓度在109~ 102 copies/μL范围内有良好的线性关系,该方法检测灵敏度可达102 copies/μL;重复性试验的组内、组间的变异系数均小于2.5%.对88份猪粪便样品进行检测,荧光定量RT-PCR检出30份猪环曲病毒阳性,常规RT-PCR检出28份猪环曲病毒阳性,两种方法的符合率为93.34%.本研究建立的荧光定量RT-PCR可用于猪环曲病毒的快速检测和流行病学调查.
猪环曲病毒、荧光定量RT-PCR、TaqMan
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S852.659.6(动物医学(兽医学))
浙江省公益技术研究项目2016C32053
2018-01-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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