鼠伤寒沙门菌SL1344株分泌性蛋白K1缺失株的构建及其生物学特性的初步研究

摘要：

为研制更加安全有效且遗传背景清晰的鼠伤寒沙门菌(S.typhimurium)疫苗弱毒株,本研究首先构建了含缺失1 011 bp sseK1基因的重组自杀性质粒PRE△sseK1,利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选SL1344的sseK1缺失株.PCR、双酶切及测序结果表明SL1344△sseK1构建成功.生物学特性初步研究表明,与亲本菌株SL1344相比,缺失株SL1344△sseK1保留了亲本株SL1344的血清型1,4,5,12∶i∶1,2,且能够稳定遗传缺失后的sseK1基因,生长速度及生化特性没有发生明显改变.小鼠毒力试验表明,SL1344△sseK1缺失株口服感染6周龄BALB/c小鼠的LD50为6.63×108CFU,毒力较亲本株SL1344下降至0.048％.免疫保护效力试验显示,小鼠免疫后第14天血清抗体IgG含量达到最高,运用鼠伤寒沙门菌野生毒株对免疫后第17天的小鼠攻毒有62.5％的保护率.以上研究结果表明,SL1344株sseK1基因缺失株构建成功,且遗传稳定,毒力明显降低,具有较好的免疫原性,为研究sseK1基因的致病机制及将其开发为更加安全有效的沙门菌弱毒疫苗候选菌株奠定了基础.

关键词：鼠伤寒沙门菌SL1344、重组自杀性质粒、sseK1基因、生物学特性

所属期刊栏目：47

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省科技攻关项目112102110019

在线出版日期：2017-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1087-1093