鲑传染性贫血病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

摘要：

为建立快速、定量的鲑传染性贫血病毒(ISAV)检测方法,基于ISAV片段7ORF1编码的结构蛋白(NS)保守基因序列,设计特异性引物和TaqMan探针,通过反应条件优化,建立ISAV的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法,对其特异性、灵敏度及重复性进行评估,将其应用于口岸进境大西洋鲑报检样本ISAV检测中,并与OIE推荐的检测方法的检测结果进行比较.结果显示,本方法特异性强,灵敏度高,最低检测灵敏度达1.31×102 copies/μL.重复性试验结果显示,本方法的批内变异系数小于1％.299份2014-2016年间进口大西洋鲑报检样本的检测结果显示,ISAV的总检出率为6.35％(19/199),该结果与OIE推荐的检测方法的结果完全一致,且利用本方法测定的19份阳性样本的Ct值普遍低于OIE推荐检测方法测得的Ct值.结果表明,本研究中所建立的方法高效、敏感、特异、重复性好,在口岸检疫中具有广阔的应用前景,对于ISAV的鉴别诊断具有一定的参考意义.

关键词：鲑传染性贫血病毒、TaqMan、荧光定量RT-PCR、口岸检疫

所属期刊栏目：47

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川出入境检验检疫局科技项目SK201503

在线出版日期：2017-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：915-919