HN蛋白携带TC标签的重组新城疫病毒的构建及鉴定

摘要：

新城疫病毒(NDV)是在世界范围内引发家禽发病和死亡的主要病因.HN作为重要的囊膜蛋白,在NDV吸附入侵过程中发挥重要作用.本研究利用反向遗传技术,在HN编码区的N端插入由6个氨基酸组成的TC标签(tetracysteine),成功转染细胞拯救获得TC标记的重组病毒La Sota-HN-NTC,经鉴定LaSota-HN-NTC能够在鸡胚中有效复制,生长曲线与亲本病毒La Sota相似.Western-blot结果显示,LaSota-HN-NTC中HN蛋白的表达量与La Sota相比无明显变化.La Sota-HN-NTC的毒力稍低于La Sota,并且TC标签能够在重组病毒中稳定存在.La Sota-HN-NTC感染的细胞中能够观察到明显的绿色荧光,表明TC标记的HN蛋白能够正常表达并被双砷染料特异性染色.NDV吸附试验表明,La Sota-HN-NTC吸附细胞受体的能力没有因为TC标签发生改变.激光共聚焦监测到了La Sota-HN-NTC感染细胞中HN蛋白的动态分布.本研究为监测HN蛋白在NDV感染过程中的动态分布,阐明HN蛋白在NDV感染中的作用机制提供了工具和基础.

关键词：新城疫病毒、TC标签、HN蛋白

所属期刊栏目：47

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：黑龙江省应用技术研究与开发计划;国家自然科学基金;黑龙江省自然科学基金

在线出版日期：2017-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：671-679