水貂肠炎病毒VP2基因的原核表达及多克隆抗体的制备

摘要：

利用原核表达系统表达水貂肠炎细小病毒(MEV)VP2衣壳蛋白,以制备抗VP2超免疫血清.根据VP2的基因序列,设计1对特异性引物,以MEV全基因组重组质粒pB-MEV-L为模板,利用PCR技术扩增出MEV VP2片段,并定向克隆到pET-32a载体中,经酶切与序列测定,证明成功构建了VP2基因原核表达质粒pET-MEV-VP2.将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后实现了高效表达.免疫印迹试验表明,获得的重组蛋白具有较好的反应原性.以该蛋白为免疫原免疫新西兰兔,制备抗血清,四免后用ELISA方法检测其效价达到1∶1 024.免疫荧光试验证明,获得的抗体具有良好的结合活性.为MEV的病原生物学研究奠定基础.

关键词：水貂肠炎病毒、VP2、原核表达、抗血清

所属期刊栏目：47

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）;中国农科院创新工程项目

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：597-602