犬细小病毒实时荧光环介导等温扩增检测方法的建立

摘要：

参照GenBank中犬细小病毒(CPV)VP2基因保守区域序列设计合成特殊的内、外引物,在扩增反应体系中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,通过恒温荧光检测仪Deaou-308C扩增检测,建立了一种快速检测CPV的实时荧光环介导等温扩增(LAMP)方法.结果显示,这种方法对CPV具有特异性的扩增反应,对照病毒核酸的扩增结果均为阴性.灵敏度试验最低可检出3.72 copies/μL的病毒核酸.重复性试验结果表明,其检测重复性良好.对30份临床宠物犬的粪便样品进行检测,与免疫胶体金检测试纸方法进行比较,符合率为90％.将本方法初步应用于大熊猫粪便中犬细小病毒的检测,结果表明,从大熊猫基地采集的84份粪便样品中有16份为细小病毒阳性,阳性率为19.0％.本方法在63℃下恒温45 rmin可以完成检测,操作简单、灵敏度高、特异性强,通过恒温实时荧光检测仪可实时检测及自动判读检测结果,对大熊猫的早期诊断非常重要.

关键词：犬细小病毒、实时荧光环介导等温扩增、大熊猫

所属期刊栏目：47

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：成都大熊猫繁育研究基金2012-12、CFP;2012-9

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：577-581