山羊痘病毒及口疮病毒ITR-059基因双重PCR检测方法的建立

摘要：

为实现山羊痘病毒(GTPV)和口疮病毒(ORFV)的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及ORFV的059基因,分别设计用于普通双重PCR的引物2对、用于二联实时荧光定量PCR的特异性引物及探针2套;探针分别用5”JOE-Eclipse3”及5”FAM-TAMRA3’荧光染料标记物进行标记.结果显示,所建立的GTPV-ITR-L-ORFV-059双重普通PCR方法,可实现对GTPV与ORFV的特异性双重检测,检测敏感度可达104 copies/μL DNA;所建立的ITR-059二联探针实时荧光定量PCR方法可同时特异性检测ORFV和GTPV产生特异性荧光信号,二联探针的检测敏感度可分别达102.87和102.52 copies/μL DNA.本研究初步建立了可同步特异性检测GTPV和ORFV的双重普通PCR及二联探针实时荧光定量PCR检测方法.

关键词：山羊痘病毒、口疮病毒、二联、普通PCR、实时PCR、探针

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分类号：S852.654(动物医学（兽医学）)

资助基金：云南省重点新产品开发计划项目2014BB014;云南省现代农业奶牛产业技术体系建设项目云财农2009171号

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：569-576