猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪流行性腹泻病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用

摘要：

为快速简便地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与猪流行性腹泻病毒(PEDV),根据GenBank中已发布的基因序列,选择PRRSV的ORF7基因和PEDV的S基因,分别设计1对特异性引物,通过对反应体系中各成分的优化,建立了可同时检测PRRSV和PEDV的双重RT-PCR方法.本方法能从PRRSV和PEDV的混合基因组中分别扩增出300 bp和578 bp的特异性片段,且对猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、乙型脑炎病毒、轮状病毒、大肠杆菌的扩增结果均为阴性;应用该方法对采自成都周边的79份临床样品进行检测,结果与单一RT-PCR的检测结果一致,具有良好的重复性;本方法检出的最小拷贝数为1.49×105copies/μL,敏感性也较好.本研究建立的双重RT-PCR方法具有较好实用性,可用于临床样品的检测.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、ORF7基因、S基因、双重RT-PCR

所属期刊栏目：47

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省科技支撑计划;“十二五”国家科技计划农村领域项目

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：544-550