鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法的建立

摘要：

本研究针对野毒株与疫苗株的H基因设计特异性引物,通过优化反应体系和反应程序,建立了一种鉴别犬瘟热病毒(CDV)野毒株与疫苗株的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量方法.检测结果表明,该方法能特异性地检测CDV野毒株,与CDV疫苗株、犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒均无交叉反应.其标准曲线的相关系数达0.987.检出敏感性达6.22×101 copes/μL,比常规PCR检测方法高100倍.应用本方法检测了42份临床疑似CD样品,其中41份为野毒株感染,随机选取15份阳性样本进行H基因克隆测序,通过进化树分析显示它们均属于Asia-Ⅰ型,与疫苗株H基因相比同源性较低,核苷酸的同源性在90.3％～91.3％之间,氨基酸同源性在96.3％～97.2％之间.该方法的建立为临床上CDV的鉴别检测提供了依据.

关键词：犬瘟热病毒、鉴别检测方法、荧光定量PCR

所属期刊栏目：47

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2017-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：435-441