猪传染性胃肠炎病毒间接免疫荧光检测方法的建立

摘要：

为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)直观、特异和快速的检测方法,将TGEV接种PK-15细胞后,以抗TGEV N蛋白的单克隆抗体为一抗,荧光素FITC标记的山羊抗小鼠IgG为二抗,建立了TGEV的间接免疫荧光(IFA)检测方法.结果显示,TGEV的最佳接种效价为1×102 TCID50,培养时间为24h,细胞最佳固定液为40 mL/L多聚甲醛,最佳封闭条件为10 g/L BSA 37℃封闭30 min,一抗的最佳使用浓度为1 ng/μL,二抗的最佳稀释度为1:100.对常见的猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒和猪圆环病毒2型等猪病痛原检测均为阴性.结果表明,建立的检测方法对TGEV具有良好的特异性.本研究建立的方法为TGEV的实验室诊断及TGEV在感染细胞中的定位和动态分布提供了有效的检测手段.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒、间接免疫荧光方法、抗TGEV N蛋白单克隆抗体

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分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;兽医生物技术国家重点实验室资助项目

在线出版日期：2017-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：109-113