牛A型多杀性巴氏杆菌新型保护性抗原的筛选及鉴定

摘要：

为筛选牛A型多杀性巴氏杆菌新型保护性抗原,采用生物信息学方法,对牛A型多杀性巴氏杆菌PmCQ2基因组中功能未知基因进行分析,从中筛选出22个具有信号肽的蛋白编码基因进行克隆表达.以PmCQ2基因组DNA为模板,22个基因经PCR扩增分别克隆到载体pET-30a(+)或pET-32a(+)上,转入E.coliBL21 (DE3)中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测,22个基因均获得表达.Western-blot检测发现有8个重组蛋白与感染PmCQ2的犊牛血清具有良好的免疫反应,以其制备抗原免疫昆明小鼠,经ELISA检测免疫小鼠血清抗体水平后,采用2 LD50的PmCQ2腹腔攻毒测定其免疫保护效果.结果表明,8个重组蛋白均能诱导小鼠产生较高水平的抗体,其中3号和9号蛋白免疫小鼠后抗体效价达到1∶12 800,且3号和9号蛋白免疫保护效果最好,免疫保护率均为30％,其余重组蛋白的免疫保护率均较低.

关键词：牛A型多杀性巴氏杆菌、新型保护性抗原、筛选、鉴定

所属期刊栏目：46

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家现代农业肉牛牦牛产业技术体系建设专项基金资助项目CARS-38;重庆市社会民生科技创新专项项目cstc2015shmszx8022,cstc2016shmszx0086;西南大学博士基金项目SWU112006

在线出版日期：2016-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1438-1443