含扩增内标的犬巴贝斯虫PCR检测方法的建立

摘要：

为了提高犬巴贝斯虫的PCR检测方法准确性,采用复合引物重组方法构建两端含有检测巴贝斯虫18S rRNA基因的PCR检测引物的扩增内标质粒(含鸡特异性基因片段),通过优化扩增内标质粒的添加量,建立了一种新的检测犬巴贝斯虫PCR方法.结果显示,在25 μL的PCR反应体系中加入1×106 copies的扩增内标的可有效地检测犬巴贝斯虫基因组DNA,该PCR方法最低检测限为1×10s copies.本试验建立的含扩增内标的PCR检测方法能快速、准确、简便的检测犬巴贝斯虫感染,同时能有效的避免假阴性现象的产生.

关键词：巴贝斯虫、犬、PCR、扩增内标、假阴性

所属期刊栏目：46

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏高校品牌专业建设工程资助项目;南京农业大学大学生研究训练计划

在线出版日期：2016-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1376-1382