脂质体介导SV40T基因转染东方田鼠成纤维细胞的研究

摘要：

采用脂质体基因转染法将含有SV40T基因的pSV3 neo质粒导入东方田鼠胚胎成纤维细胞和皮肤成纤维细胞,经过G418培养基加压筛选,定期观测每孔阳性克隆出现的时间、数量及生长状态;比较不同胎龄或日龄、细胞接种密度、传代次数、脂质体剂量对脂质体介导的SV40T基因转染东方田鼠胚胎和皮肤两种成纤维细胞效率的影响.结果显示,两种细胞的阳性克隆约在15d后出现,随着胎龄或鼠龄的增加,阳性细胞克隆在数量和增殖程度上有减少和减慢的趋势;以接种密度为1×104/孔的胚胎和皮肤成纤维细胞转染和筛选效果最好,细胞克隆增殖最快,数量最多;随着传代次数的增加,细胞克隆转染和筛选效果变差;在其他条件一致的情况下,以1 μL/孔脂质体使用剂量,阳性克隆出现的时间早、克隆数量多、生长状态好.

关键词：东方田鼠、成纤维细胞、脂质体、SV40T抗原、转染

所属期刊栏目：46

分类号：S858.91(动物医学（兽医学）)

资助基金：动物学湖南省十三五重点建设学科项目;湖南文理学院大学生创新创业研究项目

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：786-792