绵羊SP-A基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

摘要：

肺表面活性蛋白A(surfactant protein A,SP-A)具有维持肺内稳态、防御病原感染以及协助免疫应答等重要作用.本试验建立了定量检测绵羊SP-A基因及内参基因B2M(beta 2 microglobulin) mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR方法,并采用该方法对健康滩羊、小尾寒羊和滩寒杂交羊三个绵羊品种肺脏中SP-A mRNA的表达情况进行了检测.结果显示,SP-A基因和B2M基因的扩增效率分别为94.1％和95.9％;线性范围分别在1×10-1～1×10-6和1×10-1～1×10-7;相关系数分别为0.998和0.999;熔解曲线分别在84.5℃和83.0℃出现一个特异峰;滩羊SP-A mRNA的表达水平略高于小尾寒羊和滩寒杂交羊.本试验建立的绵羊SP-A基因实时荧光定量RT-PCR方法特异性好、检测线性范围广,为绵羊SP-A mRNA表达水平的检测提供了重要方法.

关键词：荧光定量RT-PCR、绵羊、肺表面活性蛋白A、mRNA

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分类号：S852.23(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国农科院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金;宁夏回族自治区自然科学基金

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：781-785