大鲵蛙病毒US22家族基因的TaqMan MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

为了进行大鲵蛙病毒(Chinese giant salamander ranavirus,CGSRV)的早期诊断,以US22家族基因作为靶基因,建立大鲵蛙病毒TaqMan MGB实时荧光定量PCR检测方法,同时对该方法进行特异性、敏感性、重复性评估,并对73份未知大鲵血液样品进行检测.结果显示,标准曲线在所选浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.997;该方法对大鲵蛙病毒的检测有高度特异性,与其他8种病毒或细菌之间均无交叉反应;灵敏性良好,能检测到2.00×101 copies/μL的标准品浓度,比普通PCR高1 000倍;批内和批间重复的变异系数均小于2％,重复性好;在73份未知样品检测中,TaqMan MGB实时荧光定量PCR能够检测到更低浓度的病毒,较常规PCR的敏感性更佳.鉴于该方法快速、特异、敏感、可重复、可定量的优点,对大鲵蛙病毒早期潜伏感染的快速诊断具有重要意义.

关键词：大鲵蛙病毒、US22家族基因、TaqMan MGB实时荧光定量PCR、大鲵

所属期刊栏目：46

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省科技支撑资助项目2014NZ0027

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：749-755