东北黑熊粪肠球菌PCR检测方法的建立及应用

摘要：

为建立一种基于细菌16S rDNA的粪肠球菌PCR检测方法,用于快速检测东北黑熊粪肠球菌感染病例,通过死亡黑熊脏器中提纯的粪肠球菌测序结果与NCBI中的粪肠球菌16S rDNA序列(登录号:NZ_AJXO01000024.1)的比对,设计了1对特异性PCR引物,并对PCR反应条件、敏感性和特异性进行了测定.结果表明,扩增条带与预期的产物大小一致,经过测序结果分析,证明该条带为目的条带,其他种属的菌株未见条带;并且当引物工作剂量为0.2 μL、酶工作剂量为0.15μL就可以扩增出清晰的目的条带,该方法的最小检出量为86 CFU;通过对13头份来自延边熊场的患病(4头)和健康(9头)黑熊粪便检测,患病样本检验结果均为PCR阳性,表明该特异性PCR诊断方法能简易、快捷地检测粪肠球菌,为进一步建立黑熊粪肠球菌病的诊断方法提供理论依据,同时也为黑熊疾病的防治奠定了临床基础.

关键词：东北黑熊、粪肠球菌、PCR

所属期刊栏目：46

分类号：S852.611(动物医学（兽医学）)

资助基金：延边大学科研项目602013135;延边大学大学生创新创业训练计划项目ydbksky2016133

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：743-748