新型鸭细小病毒VP3基因的原核表达及多克隆抗体的制备

摘要：

应用PCR方法扩增了新型鸭细小病毒(novel duck parvovirus,NDPV)的VP3基因,然后将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,获得重组质粒pGEX-VP3.将pGEX-VP3转化BL21感受态细胞后,用1,0mmol/L IPTG于37℃进行诱导.最后,分别用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果,NDPV VP3蛋白在大肠杆菌细胞中成功获得表达,表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量为84 ku.将纯化的重组VP3蛋白免疫实验家兔,制备多克隆抗体.Western-blot检测结果表明,该抗体能同时与重组的NDPV VP3蛋白及自然感染的NDPV发生反应,说明制备的抗体具有良好的抗原反应性.这些结果为进一步建立NDPV检测方法和研发新型疫苗研究奠定了物质基础.

关键词：新型鸭细小病毒、VP3基因、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：46

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海市科委科技创新医药与农业领域项目;国家自然科学基金;国家自然科学基金;公益性行业科研专项;上海市闵行区高层次人才队伍建设专项

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：717-722