一种新型同时检测6种猪病毒病简化靶序列富集多重PCR的建立和初步应用

摘要：

为建立一种新型同时检测6种猪常见病的方法,针对猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪细小病毒(PPV)的保守基因,设计6对特异引物,在引物的5'端加上一段非同源性标签序列,再设计1对可识别标签序列的超级引物.通过优化反应条件,建立了6种猪常见病毒的简化靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)检测方法.灵敏度试验结果显示,该方法对PRV、JEV、CSFV、PCV2、PRRSV、PPV核酸的最低检测限度分别为4.36×103、2.21×103、2.69×103、3.18×103、2.63×104、3.12×104 copies/μL,而单重PCR检测的最低限度分别为1.3×101、2.59×102、8.03×101、3.29×101、2.65×101、2.45×102 copies/μL.该方法对54份临床样本的检测结果与国标单重PCR检测结果的一致性为94.9％.本试验建立的方法特异、灵敏、操作简便且成本低廉,对这6种猪病常见病原的同时检测有一定的参考意义.

关键词：靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)、猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒

所属期刊栏目：46

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划2013BAD12B04

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：695-701