重组A型FMDV VP1基因减毒鼠伤寒沙门菌表达质粒的构建及表达

摘要：

本试验通过构建重组A型FMDV VP1基因减毒鼠伤寒沙门菌,诱导产生外源蛋白,为减毒鼠伤寒沙门菌作为FMDV VP1口服活载体疫苗可行性提供研究基础.将A型FMDV VP1基因克隆后测序,根据减毒鼠伤寒沙门菌的密码子偏好性进行优化,再将其插入表达载体pYA3341之中构建重组质粒pYA3341-VP1.然后,将构建的重组质粒pYA3341-VP1采用化学法转入大肠杆菌X6212中,筛选阳性克隆.经PCR鉴定和双酶切鉴定正确后,将重组质粒pYA3341-VP1依次转入减毒鼠伤寒沙门菌中间宿主X3730和表达宿主X4550中,在转入X4550后第3.5小时加入IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE与Western-blot分析.结果表明,成功构建了重组减毒沙门菌X4550-VP1载体,且表达产物大小为23 ku,与预期目的蛋白大小相符.上述结果表明,FMDV VP1基因在减毒鼠伤寒沙门菌中得到了成功表达.

关键词：口蹄疫病毒、VP1基因、减毒鼠伤寒沙门菌

所属期刊栏目：46

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）;国家生猪产业技术体系项目

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：678-683