猪带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基(PKA-C)基因的鉴定及表达

摘要：

为鉴定猪带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(TsPKA-C),分析其作为诊断抗原的可行性,利用猪带绦虫基因组和转录组数据设计猪带绦虫TsPKA-C特异引物,以猪带绦虫成虫总RNA为模板,通过RT-PCR扩增TsPKA-C基因的完整ORF,并通过生物信息学分析进行鉴定.构建pET-30a(+)-TsPKA-C重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达.纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析.结果表明,TsPKA-C的ORF由1032个核苷酸组成,编码343个氨基酸残基,与细粒棘球蚴和多房棘球蚴氨基酸序列的一致性分别达78.7％和98.0％;TsPKA-C具有蛋白激酶A的结构域及其催化亚基特征性活性位点,且存在9个潜在的线性B淋巴细胞抗原表位.TsPKA-C基因的表达产物主要以包涵体形式存在,且可与猪囊尾蚴病阳性血清发生反应,在42 ku处产生特异条带.本研究克隆并鉴定了TsPKA-C基因,其表达产物可被猪囊尾蚴病阳性血清所识别.

关键词：猪带绦虫、cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基、鉴定、表达、诊断候选抗原

所属期刊栏目：46

分类号：S852.734(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31372433

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：671-677