猪附红细胞体HspA1与DnaJ相互作用的双分子荧光互补的研究

摘要：

为研究猪附红细胞体DnaK样蛋白HspA1与DnaJ是否存在相互作用,采用双分子荧光互补技术进行检测.利用生物信息学软件预测HspA1的B细胞抗原表位和功能结构域,选取具有功能结构域且抗原表位富集的第388～609位区域为HspA1表位区.分别对HspA1编码基因a1、HspA1表位区编码基因a1-epi进行扩增,并克隆到pBiFC-VC 155载体中,同时将DnaJ编码基因dnaj克隆到pBiFC-VN 155中,分别与上述重组质粒共转染293T细胞.结果显示,成功地构建了含HspA1编码基因a1、HspA1表位区编码基因a1-epi、DnaJ编码基因dnaj的真核重组表达质粒pBiFC-VC155-a1、pBiFC-VC155-a1-epi和pBiFC-VN155-dnaj,共转染的293T细胞在荧光显微镜下均能观察到绿色荧光,表明HspA1和HspA1表位区均与DnaJ存在相互作用.本研究为进一步探讨HspA1的生物学功能和作用机制提供了新的思路.

关键词：猪附红细胞体、HspA1、HspA1表位区、DnaJ、蛋白相互作用

所属期刊栏目：46

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家质量基础的共性技术研究与应用专项;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;高层次人才科研项目

在线出版日期：2016-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：635-643