重组表达3G蛋白狂犬病病毒株的构建及重组病毒相关特性的研究

摘要：

根据狂犬病病毒SAD Bern株的全基因组序列(GenBank No.EF206720)与软件分析,将病毒基因组分为8个片段,构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,获得感染性克隆pcDNA-SAD.同时,基因合成时在G蛋白和L蛋白基因之间引入Bs1WⅠ和Nhe Ⅰ酶切位点,以插入2个串联的狂犬病病毒G蛋白基因,获得携带3个G蛋白基因的重组质粒pcDNA-SAD-3G.利用脂质体转染法,将纯化的质粒pcDNA-SAD-3G及辅助质粒pcDNA-NP、pcDNA-P、pcDNA-L和pcDNA-G共转染BSR细胞,在BHK21细胞上盲传,经RT-PCR、IFA鉴定重组病毒.结果表明,成功获得表达3个狂犬病病毒G蛋白的重组病毒RV-r3G,重组病毒RV-r3G的生长特性与亲本rSAD相比无明显差异,并且额外增加2个G基因,同样不影响重组病毒的生长性能,重组病毒RV-r3G在感染细胞中表达G蛋白的总量显著高于亲本株rSAD,RV-r3G体外嗜神经性比野生型高.本研究为进一步研发安全、有效的狂犬病疫苗候选毒株奠定了基础.

关键词：狂犬病病毒、3G蛋白、感染性克隆、重组病毒、特性研究

所属期刊栏目：46

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：“十二五”国家科技计划农村领域项目2011AA10A200

在线出版日期：2016-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：326-331