猪链球菌2型SSU05-1311蛋白的表达纯化和多克隆抗体的制备

摘要：

以猪链球菌2型菌株05ZYH33的基因组作为模板,PCR扩增SSU05-1311(简称ssFbp)基因,克隆到表达载体pET22b中,构建重组质粒pET22b-ssFbp.该重组质粒转化到大肠杆菌BL21 (DE3)中,用IPTG诱导表达SsFbp蛋白,并通过亲和层析纯化.纯化的SsFbp蛋白免疫BALB/c雌鼠,制备多克隆抗体.结果显示,SsFbp蛋白以可溶形式表达,分子质量大小为112 ku.每升培养物获得SsFbp重组蛋白20 mg,纯度大于95％.免疫筛选后获得了ssFbp蛋白的多克隆抗体.Western-blot结果显示,多克隆抗体能特异识别05ZYH33细胞壁蛋白组分中的SsFbp蛋白.本研究为进一步研究SsFbp蛋白的功能及其在致病性中的作用奠定了基础.

关键词：猪链球菌2型、SsFbp蛋白、表达和纯化、多克隆抗体

所属期刊栏目：46

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31500112

在线出版日期：2016-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：310-314