A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1在杆状病毒系统中的表达及鉴定

摘要：

为在杆状病毒表达系统中表达口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1,利用限制性酶切位点将VP1基因插入到杆状病毒表达载体pFastBac HTB,得到重组转移载体pFastBac HTB-VP1,并将其转化至DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选.将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒rBac-HTB-VP1,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)鉴定结构蛋白VP1的表达情况.IFA结果表明结构蛋白VP1能够在昆虫细胞中表达;Western-blot检测到32 ku左右的表达产物,与预期结果相符,且能够被A型FMDV豚鼠阳性超免疫血清所识别.上述结果表明,经杆状病毒真核表达系统表达的可溶性蛋白VP1具有良好的反应原性,为进一步研究A型口蹄疫病毒结构蛋白的免疫原性以及研制新型口蹄疫亚单位疫苗提供了实验依据.

关键词：口蹄疫病毒、VP1蛋白、杆状病毒、表达

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分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：“十二五”国家高技术研究发展计划863项目2011AA10A211;国家生猪产业体系项目CARS-36-06B

在线出版日期：2016-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：269-274