三种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法的建立

摘要：

为建立可同时检测新疆出血热病毒(CCHFV)、裂谷热病毒(RVFV)、拉沙病毒(LSV)的荧光基因芯片,分剐针对CCHFV和RVFV的S基因、LSV的NP基因,应用生物学软件设计了3对引物与6条探针.运用多重PCR扩增和标记目的片段,将其与基因芯片杂交,最后扫描分析结果.分别对杂交温度与杂交时间进行条件优化,最后对基因芯片的特异性、敏感性和重复性进行评估.结果显示,设计的所有探针都可以与目的片段特异性杂交,探针1a与1b可检测到CCHFV,探针2a与2b可检测到RVFV,探针3a与3b可检测到LSV.相比多重PCR,荧光基因芯片检测CCHFV的灵敏度提高了10倍,检测RVFV的灵敏度提高了100倍,检测LSV的灵敏度提高了100倍.结果表明,本试验建立的同时检测3种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法特异性高、敏感性强,可用于这3种病毒的快速检测与甄别.

关键词：新疆出血热病毒、裂谷热病毒、拉沙病毒、多重PCR、荧光基因芯片

所属期刊栏目：46

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划;公益性行业农业科研专项

在线出版日期：2016-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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