同时检测五种引起猪繁殖障碍的病毒的多重PCR的建立

摘要：

为建立一种能同时检测5种引起猪繁殖障碍的病毒的多重PCR方法,分别针对各病毒的保守序列设计了4对特异性引物,其中3对分别用于扩增猪瘟病毒(CSFV) E2基因、非洲猪瘟病毒(ASFV) VP72基因、伪狂犬病病毒(PRV) gB基因的目的片段;针对NSP2基因设计的1对引物用于区分猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV).通过对反应条件的优化,建立了快速检测CSFV、ASFV、PRV、PRRSV和HP-PRRSV的多重PCR方法.敏感性试验结果显示,该多重PCR对这5种病原核酸的最低检测量分别为2.10×103 (HP-PRRSV),1.30×103 (PRRSV),1.09×104 (CSFV),1.50×103(ASFV)和8.97×102 (PRV) copies/μL.对49份临床样品的检测结果显示,它们的混合感染率为51％(25/49).该方法对阴性样本的扩增结果均为阴性,并且无交叉反应性,表明该方法特异性良好,具有快速、灵敏且成本低等优点,能够对猪繁殖障碍病毒病的单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断,并对其流行病学调查具有深远意义.

关键词：多重PCR、非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒

所属期刊栏目：45

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划2013BAD12B04

在线出版日期：2015-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1047-1052