以乙型肝炎病毒核心蛋白为载体的PRRSV病毒样颗粒疫苗的构建

摘要：

为采用乙型肝炎病毒核心蛋白(HBc)为载体,构建含美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5糖基化蛋白抗原表位的HBc-GP5病毒样颗粒(VLPs)疫苗,对HBc序列进行密码子优化,将其克隆至pET-28a(+)载体中,获得质粒pEO-NEW.在HBc刺突顶端的免疫显性区插入优化后的GP5序列,获得重组表达质粒pEO-LEORF5,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG 22℃诱导表达.利用SDS-PAGE和Western-blot验证融合蛋白pEO-LEORF5的表达.超声破碎后利用蔗糖密度梯度离心对融合蛋白进行纯化,最后用透射电镜观察VLPs的形成情况.结果表明,重组表达质粒pEO-LEORF5构建正确.表达的融合蛋白的分子质量为32 ku,以包涵体和可溶性两种形式表达.经浓缩纯化后融合蛋白纯度可达67％,且能自主装配为VLPs.本试验成功构建出新型HBc-GP5 VLPs候选疫苗,为研发新型PRRS疫苗提供了新思路.

关键词：乙型肝炎病毒、核心蛋白、猪繁殖与呼吸综合征病毒、GP5抗原表位、病毒样颗粒疫苗

所属期刊栏目：45

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2015-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1000-1004