蒙古绵羊肌肉生长抑制素基因敲除载体的构建

摘要：

针对蒙古绵羊肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因序列的第3外显子,选择设计并合成了含有限制性内切酶酶切位点及含有与敲除载体同源20 bp碱基的2种引物.以蒙古绵羊的血液DNA为模板,利用PCR分别扩增出2套用于敲除载体的同源长短臂.将这2套同源长短臂分别连接到2个不同的基础载体pPNTⅢ和pEGFP-N1中,构建2套用于蒙古绵羊MSTN基因敲除的置换型打靶载体pPNTⅢ-S21-L32和pEGFP-N1-S0-L0,其中pPNTⅢ-S21-L32为含有正负筛选标记基因的传统敲除载体,pEGFP-N1-S0-L0为优化后正筛选标记基因为绿色荧光加强的敲除载体.经PCR、T载体连接、酶切鉴定和DNA测序证实,2套同源臂分别被正确插入到基础载体中.本研究构建的2套用于蒙古绵羊肌肉生长抑制素基因敲除的置换型打靶载体,为改善家畜产肉性状,增加肌肉质量奠定了基础.

关键词：蒙古绵羊、MSTN基因、基因敲除

所属期刊栏目：45

分类号：S826.82(家畜)

资助基金：国家科技支撑计划项目2011BAD18B01

在线出版日期：2015-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：654-660