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尤氏泰勒虫OPRT基因的优化表达

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为克隆和表达尤氏泰勒虫OPRT基因的功能区片段,并对重组OPRT蛋白的反应原性进行分析,以反转录得到的尤氏泰勒虫cDNA链为模板,PCR扩增出OPRT基因片段,然后将其克隆至pET-30a(+)栽体;把构建成功的重组质粒转化至感受态大肠杆菌BL21进行优化表达,对诱导表达的蛋白纯化后用Western-blot分析它与吕氏泰勒虫和绵羊泰勒虫阳性血清是否发生交叉反应.结果显示,OPRT基因获得了不可溶性表达,最佳表达时间为6h,最佳表达温度为28℃,且表达的重组OPRT蛋白分别与上述2种泰勒虫阳性血清发生交叉反应.结果表明,OPRT同源基因也存在于吕氏泰勒虫和绵羊泰勒虫之中.

尤氏泰勒虫、乳清酸磷酸核糖转移酶基因、优化表达、免疫印迹

45

S852.723(动物医学(兽医学))

国家自然科学基金;国家自然科学基金;公益性行业农业科研专项

2015-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

419-422

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中国兽医科学

1673-4696

62-1192/S

45

2015,45(4)

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