流产布氏杆菌BPE123基因的克隆表达及生物信息学分析
根据GenBank中流产布氏杆菌BPE123基因序列(登录号:NC_006933.1),设计引物,以布氏杆菌病疫苗菌A19全基因组DNA为模板扩增BPE123基因,将目的基因克隆入pEASY-T3载体,测序正确后,双酶切pEASY-T3-BPE123,目的片段BPE123连入pET-32a(+)表达载体,构建表达质粒pET-32a(+)-BPE123,转化大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达;对BPE123基因进行生物信息学分析.结果显示,成功构建了重组茵pET-32a(+)-BPE123-BL21 (DE3),诱导表达了融合蛋白BPE123.生物信息学分析显示,BPE123基因N端25个氨基酸是其信号肽,与其相互作用的蛋白大都与茵毛相关,它们是flgF、fliI、motA、BruAb2_0155、BruAb2_0121和BruAb2_0125.布氏杆菌属内BPE123基因序列的同源性高达99%.本研究获得了BPE123蛋白并预测了BPE123基因的相关生物学功能,为进一步探索该蛋白的免疫原性和在布氏杆菌胞内寄生过程中的作用奠定了基础.
流产布氏杆菌、BPE123基因、生物信息学
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S852.614(动物医学(兽医学))
国家高技术研究发展计划(863计划)863;2012AA101300
2015-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
407-413