家畜嗜衣原体TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

为快速检测家畜嗜衣原体,选取家畜嗜衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因的高度保守区域,设计特异性引物和探针,通过对反应条件的优化,建立家畜嗜衣原体TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法.结果显示,该方法的最低检测限为2.8×10 copies/μL,在2.8×102～2.8×106 copies/μL范围内具有良好的线性关系,其标准曲线方程为y=-3.281 5x+41.396,线性相关系数r2=0.999 4,扩增效率为101.7％;该方法可特异性检测家畜嗜衣原体,对肺炎嗜衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热嗜衣原体、流产嗜衣原体等6种动物衣原体无交叉反应,特异性好;其批间重复试验和批内重复试验的变异系数分别为0.170 2％～0.467 2％、0.331 4％～2.796％,重复性良好.采用本试验建立的方法与OIE推荐的方法进行比较,二者的结果表现出良好的符合率.该方法的建立为家畜嗜衣原体的早期检测和流行病学调查提供了有效的检测手段.

关键词：家畜嗜衣原体、荧光定量PCR、TaqMan-MGB

所属期刊栏目：45

分类号：S852.67(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业科研专项;国家质检总局科技计划项目

在线出版日期：2015-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：380-384