沙门菌毒力基因多重PCR检测方法的建立及应用
通过建立沙门茵不同毒力岛基因的多重PCR,对沙门茵毒力基因进行快速、灵敏的检测.根据GenBank中的序列设计合成16对引物,优化反应条件,建立了4组多重PCR,通过倍比稀释模板检测多重PCR的敏感性.利用建立的多重PCR对124株沙门茵进行毒力基因分布检测,验证多重PCR的实用性.电泳结果显示,多重PCR体系可有效扩增出每个目的基因.4组多重PCR体系的DNA敏感性分别为50、10、50、100 pg;菌液敏感性分别为1×104、1×104、1×105、1×105 CFU.多重PCR与单基因PCR检测沙门菌毒力基因的结果一致.结果表明,本研究建立的多重PCR可有效检测沙门茵毒力岛基因,特异性强,灵敏度高,耗时短;还可用于沙门菌毒力基因的鉴定及分子流行病学调查.
沙门菌、毒力基因、多重PCR
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S852.612(动物医学(兽医学))
公益性行业农业科研专项;国家自然科学基金
2015-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
369-374