猪传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原位点A和D的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

摘要：

为建立一种检测猪传染性胃肠炎病毒血清抗体的间接ELISA,将猪传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原位点A和D克隆到pET-2 8a(+)载体中,在大肠杆菌Rosetta(DE3) pLysS中进行表达.表达产物的分子质量为38 ku,表达形式为包涵体.通过Western-blot证实,表达产物与猪传染性胃肠炎病毒多克隆抗体能够特异性结合.将重组蛋白经过8 mol/L的尿素溶解后,作为间接ELISA的包被抗原,通过优化条件初步建立了检测猪传染性胃肠炎病毒血清抗体的间接ELISA.该方法与纯化的猪传染性胃肠炎病毒包被的间接ELISA相比,符合率达到91.53％.本研究结果对大规模地推广应用猪传染性胃肠炎间接ELISA诊断方法具有重要意义.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒、S基因、主要抗原位点A和D、间接ELISA

所属期刊栏目：45

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业科研专项;国家自然科学基金

在线出版日期：2015-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：356-360