猪白细胞介素21基因的原核表达与多抗血清的制备
为了制备猪白细胞介素21(porcine interleukin-21,pIL-21)的多克隆抗体,采用RT-PCR从猪外周血单个核细胞(PBMC)扩增获得pIL-21基因,然后将其克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a(+)之中,转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达.SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,pIL-21以可溶性蛋白形式表达,分子质量为35 ku,具有良好的反应原性.经过Ni-NTA镍离子亲和层析纯化,获得纯化的重组蛋白pIL-21.用其免疫BALB/c小鼠制备抗pIL-21血清抗体.Western-blot分析结果显示,该抗体可与杆状病毒表达的重组Cap-pIL-21、ConA和PHA共刺激的猪PBMC细胞发生特异性反应,ELISA抗体效价可达1:12 800.上述研究结果为pIL-21的生物学功能研究奠定了重要基础.
猪、白细胞介素21、原核表达、多克隆抗体
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S852.42(动物医学(兽医学))
教育部科技项目;教育部科技项目;国家自然科学基金;国家生猪产业技术体系项目
2015-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
352-355