残缘璃眼蜱subolesin基因的原核表达及表达产物的反应原性分析
为研究残缘璃眼蜱subolesin基因的生物学特性以及寻找新的抗蜱和蜱传病疫苗候选抗原,根据GenBank上登录的小亚璃眼蜱subolesin基因核苷酸序列设计特异性引物,以残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱的饥饿成蜱cDNA为模板,扩增出subolesin基因的完整阅读框(ORF).将残缘璃眼蜱subolesin基因的PCR产物经EcoRI+NotI双酶切后连接至表达载体pGEX-4T-1,把重组质粒pGEX-4T-1-subolesin导入感受态细胞BL21 (DE3)中,在37℃、1 mmol/L IPTG条件下诱导表达.利用SDS-PAGE分析subolesin基因的体外表达特征;用Western-blot分析Subolesin蛋白的反应原性.结果显示,残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱subolesin基因的ORF长度分别为492、492、486 bp,分别编码163、163、161个氨基酸.subolesin基因序列和推导的氨基酸序列的比对结果显示,残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱与参考的小亚璃眼蜱的核苷酸序列同源性分别为98％、98％、89％,氨基酸序列同源性分别为98％、99％、93％.SDS-PAGE和Western-blot结果显示,重组残缘璃眼蜱Subolesin蛋白的分子质量为45 ku,纯化的subolesin重组抗原可与抗残缘璃眼蜱全蜱血清、残缘璃眼蜱唾液腺、卵巢血清有较强的反应原性.
残缘璃眼蜱、subolesin基因、原核表达、反应原性
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S852.746(动物医学（兽医学）)
农业科技创新工程项目ASTIP;国家自然科学基金项目31201899;国际原子能机构项目CRP No.16198/R0
2015-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
331-338
