多杀性巴氏杆菌HN06株磷酸甘油酸变位酶gpmA基因的序列分析及其原核表达

摘要：

为探索糖酵解关键酶磷酸甘油酸变位酶的功能,采用PCR方法从多杀性巴氏杆菌HN06株中扩增出了磷酸甘油酸变位酶基因gpmA,将其克隆到表达载体pET 30a(+)中,测序验证后转入表达菌株大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达.结果显示,重组菌可表达出分子质量约为32 ku的重组融合蛋白,在终浓度为20 mmol/L IPTG诱导3h的情况下表达良好.表达的蛋白以可溶性蛋白的形式存在于菌体中.表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白.经过Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗多杀性巴氏杆菌HN06株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有良好的反应原性.

关键词：多杀性巴氏杆菌、磷酸甘油酸变位酶、gpmA基因、原核表达、纯化、免疫印迹

所属期刊栏目：45

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2015-03-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：57-60