猪圆环病毒1型real-time PCR检测方法的建立

摘要：

为了建立一种定量检测猪圆环病毒1型(PCV1)的实时荧光定量PCR方法,根据PCV1基因序列设计了1对特异性引物,并构建含有PCV1基因片段的重组质粒,以系列稀释后的重组质粒作为模板建立了定量检测PCV1的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法,并绘制标准曲线,进行特异性、敏感性和重复性试验.结果显示,该方法的标准曲线的决定系数为0.999,显示出优良的线性关系;最低可准确检测320copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于2％;该方法对PCV2、猪细小病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪瘟病毒等的检测结果均为阴性;对临床样品的检出率高于常规PCR方法.结果表明,建立的real-time PCR特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于PCV1的检测与定量分析.

关键词：猪圆环病毒1型、SYBR GreenⅠ、real-time PCR、定量检测

所属期刊栏目：44

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：北京市属高等学校高层次人才引进与培养计划项目CIT&TCD201304092

在线出版日期：2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1036-1041