家兔γ干扰素基因的原核表达及其表达产物的单克隆抗体的制备

摘要：

将PCR扩增的家兔γ干扰素基因克隆至pET-28a(+)原核表达载体上,构建重组载体pET-28a(+-)-IFN-γ.重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导、HisTrap亲和柱纯化,获得IFN-γ重组蛋白.以IFN-γ重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术获得4株抗IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别被命名为3H8、4G4、4F10、6C12,它们的亚型分别为IgG1、κc链,IgG2b、κc链,IgG1、κ链,IgG1、κc链.分别制备单克隆抗体腹水,结果,4株单克隆抗体腹水的间接ELISA效价在10-4～10-5之间.本试验通过制备抗家兔IFN-γ单克隆抗体,为研究和检测IFN-γ提供了一种重要的工具.

关键词：家兔、γ干扰素、原核表达、单克隆抗体

所属期刊栏目：44

分类号：S858.291(动物医学（兽医学）)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项CARS-44;CX135029

在线出版日期：2014-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：939-943