A型口蹄疫病毒多抗原表位杆状病毒表达载体的构建及表达
为构建A型口蹄疫病毒(FMDV)多抗原表位杆状病毒表达载体,将A型FMDV上5个B细胞表位(VP1140160aa、VP270-80aa、VP35267aa、3B2942aa和3D1630aa)和4个辅助性T细胞表位(VP1200-213aaVP420-34aa、3A21-35aa和3D346-370aa)通过人工合成的方法串联起来构建复合多表位基因B.然后将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac HTB.将酶切和测序鉴定正确的阳性重组质粒pFastBac HTB-B转化至大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选.将PCR鉴定正确的重组杆状病毒质粒利用CellfectinⅡReagent转染至Sf9细胞.通过间接免疫荧光试验和Western-blot检测表达情况.结果显示,能够得到与A型FMDV猪抗阳性血清结合的蛋白,大小约为22.3 ku,与预期结果相符.结果表明,成功构建了A型FMDV多抗原表位杆状病毒表达载体,并在昆虫细胞中正确表达,为下一步蛋白纯化奠定了基础.
A型口蹄疫病毒、多抗原表位、Sf9细胞、表达
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S852.659.6(动物医学（兽医学）)
国家高技术研究发展计划863项目2011AA10A211;重大动物疫病疫苗临床免疫评价技术研究与示范项目201203039;甘肃省国际科技合作计划项目1011WCGA160
2014-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
881-886
