传染性支气管炎病毒非结构蛋白nsp10单克隆抗体的制备
为了体外获得大量表达的传染性支气管炎病毒(IBV)的非结构蛋白10(nsp10)并制备其单克隆抗体,通过RT-PCR扩增获得了IBV nsp10基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中.重组载体pET-28a(+)-nsp10转化的表达宿主菌在1 mmol/L IPTG诱导5h获得高效表达.用纯化的重组蛋白His-nsp10免疫小鼠制备单克隆抗体,采用有限稀释法经过3轮筛选和鉴定最终获得了2株分泌抗nsp10单克隆抗体的细胞株1G2和3G7.2株单克隆抗体在Western-blot分析中均与重组His-nsp10蛋白反应,并通过间接免疫荧光试验识别了4种不同毒株感染的DF-1细胞.IBV nsp10单克隆抗体的成功制备为IBV的检测和nsp10蛋白功能的研究奠定了基础.
传染性支气管炎病毒(IBV)、非结构蛋白10(nsp10)、单克隆抗体
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S852.43;S852.659.6(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金;现代农业产业技术体系建设项目岗位专家项目
2014-09-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
846-851