抗鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

为了制备抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)囊膜(E)蛋白的单克隆抗体,将鸭坦布苏病毒E基因进行原核表达,目的蛋白被纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规的单克隆抗体的制备技术,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA方法筛选及3次连续克隆化共获得6株能稳定分泌抗E蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,它们分别被命名为1F3、1G2、1B11、2A5、3B6和4F9.Dot-ELISA及Western-blot分析结果表明,这6株单克隆抗体均能与原核表达的E蛋白特异性结合.经间接免疫荧光(IFA)试验验证,这6株单克隆抗体均能识别鸭坦布苏病毒感染的细胞,且荧光主要位于细胞质中.结果表明,本研究成功制备了6株抗鸭坦布苏病毒E蛋白的单克隆抗体.鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备为今后鸭坦布苏病毒快速的病原学诊断以及E蛋白的结构和功能研究奠定了物质基础.

关键词：鸭坦布苏病毒、E蛋白、原核表达、单克隆抗体、免疫印迹、斑点杂交、间接免疫荧光

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分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：现代农业产业技术体系;公益性行业科研专项

在线出版日期：2014-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：833-837