鸽源新城疫病毒F基因的克隆与原核表达

摘要：

采用RT-PCR方法扩增了鸽源新城疫病毒F基因并将其克隆至pMD18-T载体,测定其核苷酸序列.根据F基因CDS序列,设计原核表达引物,扩增F基因功能区片段,并构建了重组原核表达质粒pGEX4T-1-NDV F(924),在不同时间和温度下进行诱导表达.通过SDS-PAGE检测,目的基因表达出约60 ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,表达目的蛋白的最佳诱导时间为6h,最佳诱导温度为42℃;提取并纯化包涵体蛋白,用其免疫BALB/c小鼠,采小鼠血进行ELISA检测.结果显示,表达蛋白具有良好的免疫原性和反应原性.上述结果表明,缺失疏水区的F基因可以在大肠杆菌BL21 (DE3)中获得表达,表达的重组F蛋白具有良好的免疫原性和反应原性.

关键词：鸽、新城疫病毒、F基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：44

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：甘肃省技术研究与开发专项计划项目0805TCYL033

在线出版日期：2014-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：742-746