感染环形泰勒虫裂殖体的牛淋巴细胞酵母双杂交文库的构建
为研究环形泰勒虫裂殖体与牛淋巴细胞之间的相互作用,以感染了环形泰勒虫裂殖体的淋巴细胞系为材料,构建了感染环形泰勒虫裂殖体的牛淋巴细胞系的酵母双杂交cDNA文库.首先,提取纯化细胞系的mRNA,经反转录合成第一条链cDNA,通过LD-PCR合成双链cDNA.柱层析剔除250 bp以下的小片段;将双链cDNA与经SmaⅠ处理过的文库质粒pGADT7-Rec一起转入到酵母Y187感受态细胞内,双链cDNA与文库质粒会发生同源重组,经过抗性筛选即可得到酵母双杂交cDNA文库.文库构建结果显示,该文库库容量达2.4×107 CFU,插入片段的平均长度在1 000 bp左右,达到试剂盒建库要求.
环形泰勒虫、牛淋巴细胞、酵母双杂交、cDNA文库
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S852.723(动物医学(兽医学))
国家重点基础研究发展计划(973计划);国家自然科学基金;引进国际先进农业科学技术计划计划
2014-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
667-671