H9N2亚型禽流感病毒M1基因的克隆及其原核表达
为克隆H9N2亚型禽流感病毒M1基因并研究其原核表达产物的反应原性,从H9N2亚型禽流感病毒中提取病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法克隆了M1全长基因.把M1基因克隆至pMD18-T载体中之后进行测序.M1基因亚克隆至pET-28a(+)表达载体中,构建重组表达质粒pET-28a-M1.该重组质粒转化至大肠杆菌BL21 (DE3)并经IPTG诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定.测序分析结果表明,本研究克隆的M1基因与数株甲型流感病毒的M1基因的核苷酸同源性为89.7%~99.1%.SDS-PAGE分析表明,构建的重组蛋白以可溶性形式存在.Western-blot鉴定结果表明,它具有良好的反应原性.M1的成功表达为进一步研制新型流感疫苗奠定了基础.
禽流感病毒、M1基因、克隆、原核表达
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S852.659.5(动物医学(兽医学))
国家高技术研究发展计划863项目2013AA102806,2011AA10A215;国家自然科学基金项目31272541,31272552,81170358;教育部新世纪优秀人才支持计划项目NCET-10-0175;吉林省科技发展计划项目20111816,20080104;吉林省世行贷款农产品质量安全项目2011-Y07
2014-05-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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